Элис /Мила Йовович/

Когда-то работала на «Амбреллу», охранником особняка, служившего запасным входом в «Улей». Состояла в подстроенном браке со Спенсом Парксом. В силу неизвестных причин решила помочь организации, пытающейся уничтожить корпорацию. После инцидента с Т-вирусом временно потеряла память. Осталась жива, но попала в руки к ученым из «Амбреллы».

Мэтт Эддисон /Эрик Мебиус/

Член некой организации, пытающейся вывести «Амбреллу» и ее генетические эксперименты на чистую воду. Потерял связь с сестрой, которая работал в «Улье» под прикрытием. После инцидента пытался проникнуть в лабораторию под видом полицейского, но был схвачен спецназом «Амбреллы». Был поцарапан мутированным «Лизуном», после чего сам начал мутировать. Схвачен учеными «Амбреллы».

Уан (Первый) /Колин Сэлмон/

Командир отряда спецназа, посланного, чтобы выяснить, что произошло в «Улье» и, по возможности, устранить проблему. Убит охранной системой «Красной Королевы»

Чед Каплан /Мартин Крюз/

Спецназовец, обладает хакерскими навыками. Взламывает электронные замки и компьютеры. Весьма труслив, но тем не менее решил пожертвовать собой, чтобы дать остальным спастись. Чудом выбрался из технического туннеля, заполоненного мертвецами, но все же был убит «Лизуном» в поезде. Именно Чед помог запертым в лаборатории Элис, Мэтту и Рейн, спалив «Красную Королеву».

Рэйн Окэмпо /Мишель Родригес/

Спецназовец. Была в очень дружеских отношениях с Джей Ди Слайнсом. Весьма дерзка, но в то же время никогда не бросит свой отряд в беде. Была укушена зомби, после чего сама превратилась в последнего. Застрелена Мэттом в поезде.

Спенс Паркс /Джеймс Пьюрфой/

Главный злодей фильма. Один из охранников особняка, резервного входа в «Улей». Состоял в подставном браке с Элис. Узнав, что Элис сотрудничает с Организацией, собственноручно украл Т-вирус из лаборатории, для последующей продаже на черном рынке, и разбил одну колбу, после чего вирус распространился по всей лаборатории. Но просчитавшись, он сам оказался заперт в «Улье», частично потеряв память, но вспомнив все, он чуть не убил Элис, Мэтта и Рэйн, заперев их в затопленной лаборатории. Пытался один сбежать из «Улья» с образцом Т-вируса и антидота, но опять просчитался и был убит «Лизуном» на подходе к поезду, после чего, уже в обличье зомби был зарублен Элис.

Красная Королева /Майкела Дикер/

Голографическая проекция компьютера. Обладает внешностью дочери одного из ученых «Амбреллы» и нудным детским голосом. По ходу фильма дает героям ценные советы о зомби и Т-вирусе, но иногда ведет себя крайне неадекватно и мешает людям без проблем выбраться из лаборатории. Уничтожена Капланом.

Джей Ди Слайнс /Паскваль Эльярди/

Спецназовец, близкий друг Рэйн. Был практически съеден зомби, после чего уже как один из мертвяков был застрелен своей подругой, Рэйн Окэмпо.

Лиса Эддисон /Хайк Макэтш/

Сестра Мэтта. Входила в организацию, пытающуюся вывести на чистую воду эксперименты «Амбреллы» с биологическим оружием. Работала в «Улье» под прикрытием. Сотрудничала с Элис. Во время инцидента, как и все ученые, подверглась влиянию газа, после чего проснулась уже в качестве зомби. Убита Элис.

Медик /Лиз Мэй Брайс/

Врач из отряда спецназа «Амбреллы». Лазеры «Красной Королевы» отрезали ей голову.

Спецназовец №1 /Торстен Джерабек/

Авторы фильма не дали этому персонажу даже имени. Убит охранной системой комьютера «Красная Королева»

Спецназовец №2 /Марк Логан-Блэк/

Еще один безымянный герой. Его постигла та же участь, что и первого спецназовца.